质谱流式系统的原理分析:(1)质谱流式技术(IMassCytometry)结合了传统流式技术高效的单细胞研究能力和飞行时间质谱的全谱高分辨率优势,采用金属标记抗体与待测抗原结合,理论上可提供140个检测通道,并且克服了传统流式荧光发射基团光谱重叠的问题,实现了单细胞水平的高通量分析。
(2)质谱流式技术采用金属标记的抗体识别细胞表面或胞内的抗原,标记后的细胞经零化后进入电威耦合等离子体矩管中进行离子化,离子云随后被传输至飞行时间***分析器中,检测器依次记录各种金属离子到达的时间,检测出细胞中各种标签金属的含量,***终形成不同的金属离子信号峰。检测产生的高维数据通过分类、聚类和降维算法进行处理,结果可以反映基
于靶蛋白丰度的各种细胞群体的表型和功能。
、质谱流式系统的技术特点:
上百种独立检测通道,质谱流式仪中的电感合等离子体-飞行时间质谱(ICP-TOF)具有完整的元素检测范围(70-209amu),可以同时对单个细胞的数十个参数进行检测。2.金属元素标签,多个相同的金属离子整合在标签上,与抗体分子共价结合,增强抗体分子在ICP-TO中的信号强度。3.金属编码(Barcoding)技术