细胞计数仪的原理 (1) 台盼蓝染色原理（明场细胞计数仪）：台盼蓝是细胞跨膜染料，活细胞膜结构完整，台盼蓝无法通过，细胞呈中心透亮具有明显的轮廓。死细胞膜通透性改变，台盼蓝可跨过死细胞膜进入细胞内，使细胞颜色加深，呈现实心的圆点与活细胞中心透亮轮廓清晰有明显的差异，根据这种形态的差异可以明显区别活细胞和死细胞进行区别计数。 (2) AO/PI 荧光染色原理（暗场细胞计数仪）：AO/PI 为细胞核染料，AO 为吖啶橙是***种小分子染料，可以跨过所有细胞膜进入细胞内，使有核细胞标记上绿色荧光。PI 是碘化丙啶***种大分子染料，只有细胞死亡膜通透性改变后才能跨膜进入细胞内，使死细胞的核标记上红色荧光。AO/PI 染细胞后，死细胞会同时染上 AO 和 PI，AO 的发射光波长 532 nm 左右，PI 的激发光波长刚好与 AO 发射光波长相重，两种染料同染上死细胞核时会发生荧光共振能量转移，AO 的发射光被 PI 吸收，所以死细胞只会显示红色荧光，而活细胞只有绿色荧光。因此，通过特异性染色的细胞上标记的红色荧光和绿色荧光就可以快速辨别出死细胞和活细胞。 注：AO/PI试剂由可以发出绿色荧光的DNA结合染料吖啶橙（AcridineOrange，简称AO）和可以发出红色荧光的DNA结合染料碘化丙啶（Propidiumiodide，简称PI）组成。
